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实验室以及野外如何检测荧光蛋白GFP RFP YFP

更新时间:2022-05-19   点击次数:3629次

  对蛋白亚细胞定位的认知可能表明,蛋白可能在许多细胞进程中发挥作用。如果与下面所列的其中一种细胞器特异性试剂共定位,那么可确认目的蛋白的亚细胞位置。虽然这些细胞器标记物可用作强大的免疫荧光工具,但它们还可用作碎裂细胞裂解物的蛋白质印迹对照。

这些蛋白的表达可能在不同细胞和组织中有所不同。

  荧光蛋白的发光原理在于其发色基团经一定波长的光(激发光)照射后被激活,并将能量以光能形式释放,这时我们就能在荧光显微镜下看到日思夜想的荧光色啦!   

但由于能量不能全以光的形式辐射出来,所以荧光蛋白的发射光(荧光)的波长比激发光长。

那么我们是怎么将荧光蛋白分类的呢?通常,人们按发射波长来分类并定义其颜色(下图)。

RFPs(红色荧光蛋白): 

mCherry具有优异光稳定性,通用红色单体(但融合表达时有较弱的齐聚效应)

tdTomato具有mCherry相同的光稳定性,亮度强,是追踪表达水平的理想选择,但为串联二聚体,可以在融合标签大小不干扰蛋白质功能的情况下使用

mStrawberry信号亮的红色单体,但光稳定性要弱于mCherry

DsRed是细胞毒性小的RFP

mApple在蛋白的融合表达中是mCherry不错的替代物,但其光稳定性要远弱于mCherry

mKate2从参数方面考量是综合亮度、光稳定性和齐聚性的RFP。

OFPs(橙色荧光蛋白):

mOrange橙色单体

YFPs(黄色荧光蛋白):

mVenus是亮度*的黄色单体

GFPs(绿色荧光蛋白):

EGFP

BFPs(蓝色荧光蛋白):

mTagBFP2稳定,成熟快、亮度极亮的蓝色单体

上面是通用一些荧光蛋白参数,再好的载体也需要找对合适的光源,光源的选择对于载体信号的激发也是*的,美国LUYOR公司实验室仪器事业部致力于研究和开发荧光观测装备,其产品系列有 LUYOR-3415RG双荧光蛋白观测灯,LUYOR-3430、LUYOR-3260单荧光蛋白观测手电筒。荧光是各种各样细胞生物学、神经系统学及其他领域研究中的一种强大和广泛使用的工具。LUYOR的LUYOR-3415RG和LUYOR-3430、LUYOR-3260除了可用于筛选转基因生物外,还可以用于样本的预筛选、辅助解剖、用于珊瑚研究等

  

LUYOR-3415RG双荧光蛋白观察灯的用途:

用于检测、筛选转绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(DsRed)基因的植物、动物及微生物,如水稻、玉米、斑马鱼、小鼠、细:菌、真菌等等...

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LUYOR-3415RG双荧光蛋白观察灯的产品优势:

1. 大功率输出,无需暗室,也可轻松激发荧光。

2.检测效率高,黑暗中检测一目了然

3.LED寿命50000h,且系统稳定,可长时间使用 

4.直接检测,而无需用底物显色,所以安全,对被检测对象无伤害

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激发光源激发出绿色荧光时,用黄色滤光镜观测,可检测含绿色荧光蛋白(GFP)的生物;激发光源激发红色荧光时,用红色滤光镜观测,可检测含红色荧光蛋白(DsRed)的生物。

 


注:


1. LUOYR-3415R用于观测绿色荧光蛋白


GFP:绿色荧光;  fluorescein荧光素


2. LUOYR-3415C用于观测黄色荧光蛋白


YFP:黄色荧光蛋白;  Venus:金色;  Lucifer Yellow:荧光黄


3. LUOYR-3415G用于观测红色荧光蛋白


DsRed:红色荧光蛋白;   TdTomato:番茄红


4. LUOYR-3415V用于观测紫色荧光蛋白


CFP:青色荧光蛋白;   BFP:碱性胎儿蛋白


5. LUOYR-3415U用于观测:


DAPI:蓝色荧光


LUYOR-3415荧光蛋白激发光源的物理技术参数:

波长:可任意选择2种波长:365nm,400nm, 450nm, 485nm,520nm


质量:净重0.9kg,毛重:4kg,尺寸:180x200mm(长x高),头部直径120mm。


功率:单波长15w,总功率27w。


输入电压:交流100-260v,频率50/60Hz。


包装箱尺寸:400x300x150mm(长x宽x高)


距灯150mm处照射直径为180mm。


LUYOR-3415荧光蛋白激发光源的标准配置:

luv-50观察眼镜,luv-30观察眼镜,说明书,合格证,保修卡,铝合金手提箱。


LUYOR-3415荧光蛋白激发光源的主要产品应用:

检测转绿色荧光蛋白(GFP)基因、红色荧光蛋白(DsRed)基因植物:水稻、小麦、玉米、大豆、棉花、拟南芥

检测转GFP、DsRed基因动物:小鼠、兔子、猴子等;

检测转GFP、DsRed基因微生物:细菌、真菌、酵母等;

检测GFP、DsRed基因组织特异性表达;


上海路阳仪器有限公司
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地址:上海市松江区新桥镇泗砖南路255弄120号
主营产品:黑光灯,探伤灯,紫外交联仪,实验室高强度紫外线灯,荧光蛋白激发光源,GFP观察灯,筛选转基因荧光蛋白GFP激发光源,紫外线探伤灯,LED磁粉探伤灯,荧光检漏灯,荧光检漏剂,检漏手电筒,脱脂检测灯,荧光蛋白观察灯

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